Plasmide Double Nickase (h) TorsinA: sc-404651-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TorsinA correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TorsinA Double Nickase (h) et le plasmide TorsinA Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TOR1A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TorsinA Antibody (D-7): sc-373915
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TorsinA | sc-404651-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TorsinA | sc-404651-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TOR1A code pour la TorsineA, une ATPase AAA+ localisée au réticulum endoplasmique et à l’espace périnucléaire, où elle contribue à l’intégrité de l’enveloppe nucléaire et à l’homéostasie des membranes internes. La TorsineA participe à des processus tels que la biogenèse du complexe du pore nucléaire, le remodelage membranaire et la régulation des voies de contrôle qualité des protéines liées au stress du RE. La perturbation des fonctions associées à TOR1A peut altérer le couplage nucléo‑cytosquelettique et le trafic intracellulaire, ce qui en fait un nœud clé pour l’étude de la protéostasie et des phénotypes cellulaires liés à l’enveloppe nucléaire. Des variants de TOR1A sont fortement associés à la dystonie à début précoce et à la neurobiologie apparentée, offrant un point d’entrée moléculaire pour des études mécanistiques dans des modèles neuronaux et non neuronaux.
TorsinA Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TOR1A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TOR1A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TOR1A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TOR1A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.