Plásmido Doble Nickase (h) TMEM135: sc-407333-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TMEM135 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TMEM135 (h) y el plásmido de doble nickasa TMEM135 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TMEM135. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TMEM135 | sc-407333-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TMEM135 | sc-407333-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TMEM135 codifica una proteína conservada de membrana multipaso implicada en la homeostasis mitocondrial y peroxisomal, con funciones descritas en la dinámica de los orgánulos, el manejo de lípidos y la bioenergética celular. TMEM135 se ha relacionado con programas transcripcionales que regulan el metabolismo de los ácidos grasos y las respuestas al estrés oxidativo, lo que la sitúa en la interfaz entre la adaptación metabólica y el control de calidad de los orgánulos. La alteración de la expresión de TMEM135 se ha asociado con cambios en la morfología mitocondrial y en procesos relacionados con los peroxisomas, que suelen verse perturbados en contextos de enfermedades metabólicas y neurodegenerativas. En consecuencia, TMEM135 se estudia en vías que incluyen la oxidación de lípidos, la gestión de especies reactivas de oxígeno y la comunicación entre orgánulos que influye en la supervivencia celular y el estado metabólico.
TMEM135 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TMEM135 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TMEM135. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TMEM135. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TMEM135 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.