TMEM134 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406513

Descripción general

TMEM134 codifica la proteína transmembrana 134, una proteína de membrana multipaso prevista que se cree que se localiza en compartimentos de membrana intracelulares y contribuye a la organización y el tráfico de membranas. Aunque sus socios moleculares no están completamente definidos, TMEM134 se ha vinculado a procesos que dependen de la dinámica del endomembrana, entre ellos la clasificación de proteínas, el recambio de receptores y la señalización sensible al estrés. Se han descrito patrones alterados de expresión de TMEM134 en estudios transcriptómicos en diversos contextos de enfermedad, lo que respalda su uso como regulador candidato en vías relevantes para la homeostasis celular. Por ello, el análisis funcional de TMEM134 es valioso para desentrañar mecanismos asociados a membranas que modulan las salidas de señalización, la proliferación y la supervivencia en modelos celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TMEM134 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TMEM134 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TMEM134 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TMEM134 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TMEM134.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TMEM134 para la investigación de la señalización de TMEM134, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TMEM134 críticos para la función de TMEM134
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TMEM134 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TMEM134 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TMEM134 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TMEM134. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TMEM134 (h) y el plásmido HDR TMEM134 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TMEM134 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TMEM134 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.