Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TLR9 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429882-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TLR9O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TLR9 (m) e o Plasmídeo Double Nickase TLR9 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tlr9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TLR9 Anticorpo (5G5): sc-47723
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TLR9 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429882-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TLR9 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-429882-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Tlr9** de camundongo codifica o receptor do tipo Toll 9 (TLR9), um receptor endossomal de reconhecimento de padrões que detecta motivos CpG não metilados em DNA de origem microbiana e também derivado do próprio organismo. Após a ligação ao ligante e a maturação do endossomo, o TLR9 sinaliza principalmente por meio de **MYD88**, ativando as cascatas **IRAK–TRAF6** e induzindo a transcrição, dependente de **NF-κB** e **IRF7**, de citocinas pró-inflamatórias e interferons do tipo I. Essa via coordena a ativação da imunidade inata em macrófagos, células dendríticas e células B, modulando a apresentação de antígenos e a polarização da resposta imune adaptativa. A sinalização desregulada de TLR9 tem sido implicada em fenótipos inflamatórios e autoimunes, respostas aberrantes a ácidos nucleicos e interações entre tumor e sistema imune em modelos murinos.
TLR9 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tlr9 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tlr9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tlr9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tlr9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.