TLR8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431303
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TLR8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TLR8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TLR8 Anticorpo (D-8): sc-373760
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TLR8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-431303 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O Tlr8 codifica o receptor Toll-like 8 (TLR8), um receptor endossomal de reconhecimento de padrões que detecta RNA de cadeia simples derivado de patógenos e determinados agonistas sintéticos para iniciar a sinalização imune inata. Após a ativação, o TLR8 aciona cascatas dependentes de MYD88 que convergem para as vias de NF-κB e MAPK, promovendo programas de transcrição de citocinas inflamatórias e mediadores coestimuladores que modulam respostas mieloides e linfoides. Em camundongos, o TLR8 contribui para a regulação do equilíbrio de citocinas e para a comunicação cruzada entre receptores endossomais sensores de ácidos nucleicos, influenciando a apresentação de antígenos e a imunidade adaptativa subsequente. A desregulação da sinalização associada ao TLR8 tem sido vinculada a fenótipos inflamatórios e a alterações na defesa do hospedeiro, tornando-o relevante para estudos de biologia de infecções, mecanismos de autoimunidade e estresse imunometabólico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TLR8 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tlr8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tlr8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tlr8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TLR8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tlr8 para a investigação da sinalização de TLR8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tlr8 críticos para a função TLR8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tlr8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TLR8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TLR8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tlr8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TLR8 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TLR8 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tlr8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tlr8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.