TLR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2): sc-423418-KO-2

Übersicht

Tlr1 kodiert den murinen Toll-like-Rezeptor 1 (TLR1), einen Mustererkennungsrezeptor, der an der Zelloberfläche mit TLR2 ein funktionelles Heterodimer bildet, um triacylierte bakterielle Lipopeptide zu erkennen. Die Ligandenbindung löst eine MyD88-abhängige Signalübertragung sowie die Aktivierung der NF-κB- und MAPK-Kaskaden aus und fördert dadurch die Transkription proinflammatorischer Zytokine und Chemokine, die die angeborene und nachgeschaltete adaptive Immunantwort prägen. Die TLR1-Aktivität beeinflusst die Aktivierung von dendritischen Zellen und Makrophagen, die Barriereimmunität sowie die Interaktion mit mikrobiellen Produkten innerhalb des Mikrobioms. Eine fehlregulierte TLR1/TLR2-Signalgebung wurde mit inflammatorischen Phänotypen und einer veränderten Wirtsabwehr in Infektions- und immunvermittelten Krankheitsmodellen in Verbindung gebracht.

Das TLR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Tlr1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Tlr1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Tlr1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TLR1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Tlr1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TLR1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Tlr1-Exone abzielen, die für die TLR1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Tlr1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TLR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom TLR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Tlr1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TLR1 HDR-Plasmid (m) und TLR1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Tlr1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Tlr1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.