Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TGFβ2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400496
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TGFβ2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TGFβ2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TGFβ2 Anticuerpo (H-6): sc-374659
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TGFβ2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400496 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TGFB2 codifica el factor de crecimiento transformante beta 2 (TGFβ2), una citocina secretada que señaliza a través de quinasas serina/treonina de los receptores de TGF-β para activar la transcripción dependiente de SMAD2/3 e interaccionar con vías no canónicas como MAPK, PI3K/AKT y las GTPasas tipo Rho. TGFβ2 es un regulador clave de la remodelación de la matriz extracelular, la transición epitelio‑mesénquima, la modulación inmunitaria y las decisiones de destino celular durante el desarrollo y la homeostasis tisular. La desregulación de la señalización de TGFB2 se ha asociado con fibrosis, reparación anómala de heridas e interacciones tumor‑estroma, lo que la hace relevante para estudios de fenotipos impulsados por el microambiente. En modelos celulares humanos, la perturbación de TGFB2 facilita el análisis mecanístico de la dinámica de la vía de TGF‑β y de los programas reguladores génicos aguas abajo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TGFβ2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TGFB2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TGFB2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TGFB2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TGFβ2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TGFB2 para la investigación de la señalización de TGFβ2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TGFB2 críticos para la función de TGFβ2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TGFB2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TGFβ2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TGFβ2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TGFB2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TGFβ2 (h) y el plásmido HDR TGFβ2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TGFB2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TGFB2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.