Plásmido Doble Nickase (h) TFIIIC110: sc-404261-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TFIIIC110 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TFIIIC110 (h) y el plásmido de doble nickasa TFIIIC110 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GTF3C2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TFIIIC110 Anticuerpo (2395C2a): sc-81406
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TFIIIC110 | sc-404261-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TFIIIC110 | sc-404261-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GTF3C2 codifica TFIIIC110, una subunidad central del complejo TFIIIC que reconoce elementos promotores internos en genes transcritos por la ARN polimerasa III, incluidos los ARNt y otros ARN pequeños no codificantes. Al favorecer el reclutamiento de TFIIIB y el ensamblaje del complejo de preiniciación de la Pol III, TFIIIC110 contribuye a programas de transcripción basal que acoplan el metabolismo del ARN con el crecimiento celular y las respuestas al estrés. TFIIIC también interactúa con la organización de la cromatina y la arquitectura nuclear, vinculando los loci de la Pol III con características regulatorias más amplias del genoma. La desregulación del control transcripcional de la Pol III y de las subunidades de TFIIIC se ha asociado con estados proliferativos y una homeostasis alterada de ARN pequeños, lo que convierte a GTF3C2 en una diana útil para estudios mecanísticos de la transcripción y la regulación genómica.
TFIIIC110 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GTF3C2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GTF3C2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GTF3C2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GTF3C2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.