Particules Lentivirales d'Activation (h) Tescalcin: sc-408244-LAC

Le gène humain **TESC** code la **tescalcin**, une petite protéine de liaison au Ca²⁺ de type **EF-hand**, enrichie dans les contextes hématopoïétiques et dans les cellules excitables, qui agit comme régulateur dépendant du calcium de programmes de signalisation et de différenciation cellulaire. La tescalcin interagit avec certains partenaires pour moduler l’équilibre kinases/phosphatases et les voies liées au Ca²⁺, influençant des processus tels que la prolifération, l’engagement de lignée et les réponses transcriptionnelles induites par des stimuli. Grâce à sa sensibilité à la dynamique du calcium intracellulaire, la tescalcin peut affecter la signalisation associée aux MAPK et d’autres réseaux en aval qui couplent les flux de calcium à des modifications de l’expression génique et de l’état cellulaire. Des altérations de l’expression de **TESC** ont été rapportées dans plusieurs contextes pertinents pour la maladie, ce qui soutient son intérêt en tant que nœud mécanistique pour étudier les dérégulations de la signalisation, de la différenciation et des réponses cellulaires au stress.

Les particules d'activation lentivirales Tescalcin (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de TESC dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Tescalcin (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription TESC, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Tescalcin. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif TESC ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.