Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TdT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406822
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TdT O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TdT, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TdT Anticorpo (C-11): sc-393710
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TdT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406822 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DNTT codifica a desoxinucleotidil transferase terminal (TdT), uma polimerase de DNA especializada que adiciona nucleotídeos não templados aos intermediários de recombinação V(D)J durante o desenvolvimento dos linfócitos. Ao aumentar a diversidade de junção nos loci de imunoglobulinas e de receptores de células T, a TdT molda os repertórios de receptores de antígeno e contribui para a especificidade da imunidade adaptativa. A atividade da TdT está intimamente ligada aos processos de reparo de quebras de dupla fita do DNA e aos eventos de união de extremidades que ocorrem nas sequências sinalizadoras de recombinação. A expressão aberrante de DNTT é amplamente usada como marcador de estados linfoides imaturos e é frequentemente estudada no contexto da leucemogênese, da instabilidade genômica e da especificação de linhagem.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TdT (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DNTT em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DNTT, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DNTT na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TdT.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DNTT para a investigação da sinalização de TdT, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DNTT críticos para a função TdT
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DNTT para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TdT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TdT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DNTT. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TdT Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TdT (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DNTT para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DNTT definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.