TDAG8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416613-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TDAG8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TDAG8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TDAG8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GPR65. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TDAG8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416613-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TDAG8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416613-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GPR65 humano codifica o TDAG8, um receptor acoplado à proteína G sensível a prótons, enriquecido em contextos imunes e hematopoéticos, que se acopla principalmente a Gs e à sinalização por cAMP em resposta à acidose extracelular. O TDAG8 integra sinais dependentes de pH em microambientes inflamatórios, influenciando a ativação de leucócitos, programas de citocinas e decisões de sobrevivência celular, e interage com vias mais amplas mediadas por GPCR que modulam respostas de MAPK e transcrição. A regulação alterada de GPR65 tem sido investigada em condições caracterizadas por acidose tecidual e sinalização imune desregulada, incluindo cenários inflamatórios e autoimunes, bem como na biologia do microambiente tumoral. Essas características tornam o TDAG8 um ponto de entrada útil para estudar como o pH extracelular remodela redes de sinalização e o comportamento de células imunes.
TDAG8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GPR65 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GPR65. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GPR65. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GPR65 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.