Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TC-PTP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422509
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TC-PTP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TC-PTP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TC-PTP Anticorpo (D-3): sc-398997
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TC-PTP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422509 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Ptpn2 de camundongo codifica a fosfatase de tirosina proteica de células T (TC-PTP), uma PTP não receptora que desfosforila intermediários-chave de sinalização para restringir vias de citocinas e de fatores de crescimento. A TC-PTP regula negativamente a sinalização JAK/STAT e pode modular eventos de fosforilação associados ao receptor de insulina e ao EGFR, moldando programas transcricionais que controlam proliferação, sobrevivência e ativação imune. Por meio dessas funções, Ptpn2 ajuda a manter a homeostase imunológica e a integridade da barreira epitelial, e sua desregulação tem sido associada a fenótipos inflamatórios e autoimunes, bem como a alterações na sinalização associada a tumores em modelos experimentais. Assim, Ptpn2 é amplamente estudado para entender mecanismos de responsividade a citocinas, limiares de sinalização em células T e a biologia de doenças impulsionadas por inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TC-PTP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ptpn2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ptpn2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ptpn2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TC-PTP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ptpn2 para a investigação da sinalização de TC-PTP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ptpn2 críticos para a função TC-PTP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ptpn2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TC-PTP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TC-PTP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ptpn2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TC-PTP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TC-PTP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ptpn2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ptpn2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.