Plásmido Doble Nickase (m) TBX2: sc-423279-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)TBX2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TBX2 (m) y el plásmido de doble nickasa TBX2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Tbx2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TBX2 Anticuerpo (D-3): sc-514291
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) TBX2 | sc-423279-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen **Tbx2** de ratón codifica el factor de transcripción tipo T-box **TBX2**, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que determina el patrón embrionario y la organogénesis, incluido el desarrollo de las extremidades y del corazón. TBX2 funciona predominantemente como un represor transcripcional y se integra con programas de ciclo celular y diferenciación mediante la modulación de inhibidores de CDK y de redes de señalización del desarrollo como las vías **BMP** y **Wnt**. La alteración de la actividad de TBX2 se ha relacionado con una proliferación y una especificación de linaje desreguladas, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar circuitos reguladores génicos del desarrollo. En contextos de investigación relevantes para enfermedad, TBX2 se examina con frecuencia por sus funciones en programas transcripcionales oncogénicos, la evasión de la senescencia y la plasticidad de células tumorales en sistemas modelo.
TBX2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tbx2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tbx2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tbx2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tbx2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.