TBC1D15 Lentiviral Activation Particles (m): sc-426147-LAC

Das Mausgen **Tbc1d15** kodiert **TBC1D15**, ein Rab-GTPase-aktivierendes Protein mit TBC-Domäne, das zur Regulation des Membrantraffickings und der Organell-Dynamik beiträgt. TBC1D15 wurde mit der Kontrolle der mitochondrialen Morphologie sowie mit Kontakten zwischen Mitochondrien und Lysosomen in Verbindung gebracht und verknüpft damit vesikulären Transport mit Mitophagie und umfassenderen Autophagie-Signalwegen. Über Rab-abhängiges Trafficking und den Abbau beschädigter Organellen kann TBC1D15 den Zellstoffwechsel, Stressantworten und Qualitätskontrollprogramme beeinflussen. Fehlregulierte mitochondriale Dynamik und Autophagie stehen im Zentrum vieler krankheitsrelevanter Prozesse, darunter Neurodegeneration, Entzündung und metabolische Dysfunktion, was **Tbc1d15** zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien in Mausmodellen macht.

TBC1D15 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Tbc1d15-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TBC1D15 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Tbc1d15-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TBC1D15-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Tbc1d15-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.