T2R38 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-436483-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- T2R38O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase T2R38 (m) e o Plasmídeo Double Nickase T2R38 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tas2r138. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
T2R38 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-436483-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
T2R38 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-436483-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino **Tas2r138** codifica o receptor de gosto amargo **T2R38**, um GPCR que detecta ligantes amargos relacionados à tioureia e se acopla à sinalização por proteína G para modular a dinâmica intracelular de Ca²⁺ e vias subsequentes de segundos mensageiros. Além da percepção gustativa, receptores da família T2R são expressos em tecidos extraorais, onde podem influenciar respostas quimiossensoriais e programas de sinalização celular ligados à função epitelial e imune. Variações em **Tas2r138** e alterações na sinalização do receptor são frequentemente estudadas no contexto da biologia sensorial e da quimiorrecepção, com relevância mais ampla para os mecanismos pelos quais a sinalização de GPCRs molda respostas em nível tecidual. Por ser um locus codificador de receptor de fácil manipulação, **Tas2r138** permite estudos focados em vias de ativação de GPCRs, transdução de sinais e adaptações transcricionais dependentes do receptor.
T2R38 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tas2r138 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tas2r138. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tas2r138. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tas2r138 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.