Synaptotagmin III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423245
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Synaptotagmin III O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Synaptotagmin III, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Synaptotagmin III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423245 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Syt3** do camundongo codifica a **sinaptotagmina III**, uma proteína de domínio C2 ancorada à membrana que atua como sensor de Ca²⁺, acoplando o influxo de cálcio ao tráfego vesicular regulado e à fusão de membranas. A sinaptotagmina III contribui para a exocitose de vesículas sinápticas e para a reciclagem endocítica, ajudando a moldar a cinética de liberação de neurotransmissores e a plasticidade sináptica de curto prazo. Por meio de interações dependentes de Ca²⁺ com fosfolipídios e com a maquinaria associada às proteínas SNARE, ela influencia vias de tráfego dependentes da atividade em neurônios e em outros tipos de células secretoras. Alterações na sinalização da família das sinaptotagminas têm sido associadas a mecanismos relevantes para fenótipos do neurodesenvolvimento e neurodegenerativos, sustentando o **Syt3** como alvo para investigar disfunção sináptica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Synaptotagmin III (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Syt3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Syt3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Syt3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Synaptotagmin III.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Syt3 para a investigação da sinalização de Synaptotagmin III, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Syt3 críticos para a função Synaptotagmin III
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Syt3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Synaptotagmin III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Synaptotagmin III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Syt3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Synaptotagmin III Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Synaptotagmin III (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Syt3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Syt3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.