Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Synaptogyrin-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423238
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Synaptogyrin-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Synaptogyrin-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Synaptogyrin-1 Anticuerpo (A-6): sc-393456
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Synaptogyrin-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423238 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Syngr1 codifica la sinaptogirina-1, una proteína de membrana de vesículas sinápticas enriquecida en terminales presinápticas que contribuye a la organización de las vesículas y a una liberación eficiente de neurotransmisores. Participa en procesos centrales del ciclo de las vesículas sinápticas, incluidos el tráfico vesicular, el acoplamiento (docking) y la endocitosis, y se solapa funcionalmente con vías que regulan el acoplamiento exo-endocítico y la dinámica de la membrana presináptica. En neuronas de ratón, la sinaptogirina-1 se utiliza como marcador y como nodo mecanístico para estudiar la transmisión sináptica y la plasticidad en sinapsis excitadoras e inhibidoras. Las alteraciones en el manejo de las vesículas sinápticas y en las redes de proteínas presinápticas que involucran a la sinaptogirina-1 son relevantes para la investigación de mecanismos de enfermedades del neurodesarrollo y neurodegenerativas caracterizadas por disfunción sináptica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Synaptogyrin-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Syngr1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Syngr1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Syngr1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Synaptogyrin-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Syngr1 para la investigación de la señalización de Synaptogyrin-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Syngr1 críticos para la función de Synaptogyrin-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Syngr1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Synaptogyrin-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Synaptogyrin-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Syngr1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Synaptogyrin-1 (m) y el plásmido HDR Synaptogyrin-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Syngr1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Syngr1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.