SUSD2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412691

Descripción general

SUSD2 (dominio sushi que contiene 2) codifica una proteína transmembrana de paso único con dominios sushi/CCP extracelulares, implicados en interacciones célula–célula y célula–matriz. Entre las funciones descritas se incluyen la modulación de programas de adhesión y migración y la regulación de señales relevantes para el sistema inmunitario en la superficie celular, lo que vincula a SUSD2 con procesos como la organización epitelial y la comunicación entre estroma y tumor. La expresión alterada de SUSD2 se ha asociado con fenotipos oncogénicos en múltiples tejidos, incluidos cambios en la capacidad invasiva y el potencial metastásico. Como andamio asociado a la superficie celular, SUSD2 se estudia en el contexto de redes de señalización que influyen en la detección del microambiente extracelular y la plasticidad celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SUSD2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SUSD2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SUSD2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SUSD2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SUSD2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SUSD2 para la investigación de la señalización de SUSD2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SUSD2 críticos para la función de SUSD2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SUSD2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SUSD2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SUSD2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SUSD2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SUSD2 (h) y el plásmido HDR SUSD2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SUSD2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SUSD2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.