SULT1E1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423185

Descripción general

Sult1e1 codifica la sulfotransferasa de estrógenos (SULT1E1), una enzima citosólica de conjugación de fase II que cataliza la sulfatación de los estrógenos para generar sulfatos esteroideos inactivos y más solubles en agua. Al regular el equilibrio entre estrógenos activos y conjugados, SULT1E1 influye en la señalización del receptor de estrógenos y en la comunicación cruzada con las vías hepáticas de metabolismo de xenobióticos, incluidas interacciones con la homeostasis de esteroides, el manejo de ácidos biliares y redes más amplias de sulfotransferasas. La actividad alterada de SULT1E1 puede modificar programas transcripcionales dependientes de hormonas y se ha asociado con estados metabólicos e inflamatorios en hígado y tejido adiposo, así como con fenotipos sensibles a hormonas en biología reproductiva. Por ello, en modelos murinos, Sult1e1 es relevante para estudiar la regulación endocrina, las diferencias sexuales en el metabolismo y el control específico por tejido de la señalización de esteroides.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SULT1E1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sult1e1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sult1e1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sult1e1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SULT1E1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sult1e1 para la investigación de la señalización de SULT1E1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Sult1e1 críticos para la función de SULT1E1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sult1e1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SULT1E1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SULT1E1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sult1e1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SULT1E1 (m) y el plásmido HDR SULT1E1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sult1e1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sult1e1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.