Sulf-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403277

Descripción general

SULF2 codifica Sulf-2, una endosulfatasa extracelular que elimina de forma selectiva grupos sulfato 6-O de los proteoglicanos de sulfato de heparán, remodelando así el “código” de sulfatación que controla la disponibilidad de ligandos y la interacción con receptores. Al editar el sulfato de heparán en la superficie celular y en la matriz pericelular, Sulf-2 modula las salidas de señalización de vías como FGF, WNT y VEGF, e influye en la proliferación, migración, diferenciación y adhesión celulares. La alteración de la expresión de SULF2 y la remodelación del sulfato de heparán se han asociado con la regulación del microambiente tumoral, el comportamiento invasivo y las respuestas angiogénicas, y también son relevantes en procesos fibróticos e inflamatorios. Estas funciones hacen de SULF2 una diana útil para analizar la señalización dependiente de la matriz extracelular y la regulación de la comunicación celular mediada por glicosaminoglicanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Sulf-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SULF2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SULF2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SULF2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Sulf-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SULF2 para la investigación de la señalización de Sulf-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SULF2 críticos para la función de Sulf-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SULF2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Sulf-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Sulf-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SULF2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Sulf-2 (h) y el plásmido HDR Sulf-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SULF2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SULF2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.