Sulf-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403277

Visão geral

SULF2 codifica a Sulf-2, uma endossulfatase extracelular que remove seletivamente grupos 6-O-sulfato de proteoglicanos de heparan sulfato, remodelando assim o “código” de sulfatação que controla a disponibilidade de ligantes e a interação com receptores. Ao editar o heparan sulfato na superfície celular e na matriz pericelular, a Sulf-2 modula as respostas de sinalização de vias como FGF, WNT e VEGF, influenciando a proliferação, migração, diferenciação e adesão celulares. Alterações na expressão de SULF2 e na remodelação do heparan sulfato têm sido associadas à regulação do microambiente tumoral, ao comportamento invasivo e a respostas angiogênicas, além de serem relevantes para processos fibróticos e inflamatórios. Essas funções tornam o SULF2 um alvo útil para dissecar a sinalização dependente da matriz extracelular e a regulação da comunicação celular mediada por glicosaminoglicanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sulf-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SULF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SULF2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SULF2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sulf-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SULF2 para a investigação da sinalização de Sulf-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SULF2 críticos para a função Sulf-2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SULF2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Sulf-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Sulf-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SULF2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Sulf-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Sulf-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SULF2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SULF2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.