STAU1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423181

Übersicht

Das murine Gen *Stau1* kodiert STAU1, ein doppelsträngige-RNA-bindendes Protein, das den Staufen-abhängigen mRNA-Abbau vermittelt und die Lokalisation, Stabilität und Translation von mRNA reguliert. STAU1 ist an der posttranskriptionellen Genregulation durch den Aufbau von Ribonukleoproteinkomplexen beteiligt und koppelt die RNA-Überwachung mit Prozessen wie der Dynamik von Stressgranula und dem zytoskelettalen Transport. In Säugerzellen wurde eine veränderte STAU1-Aktivität mit einer Fehlregulation des RNA-Stoffwechsels in Verbindung gebracht, die neuronale Funktionen und die Muskelhomöostase beeinträchtigt, was STAU1 für Studien zu Neurodegeneration und neuromuskulären Phänotypen relevant macht. Als Knotenpunkt in RNA-regulatorischen Netzwerken bietet STAU1 einen gut zugänglichen Ansatzpunkt, um zu untersuchen, wie Entscheidungen über das Schicksal von mRNA den Zellzustand und die Proteomzusammensetzung prägen.

Das STAU1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Stau1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Stau1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Stau1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die STAU1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Stau1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der STAU1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Stau1-Exone abzielen, die für die STAU1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Stau1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom STAU1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom STAU1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Stau1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das STAU1 HDR-Plasmid (m) und STAU1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Stau1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Stau1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.