Stat2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-423175-KO-2
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Stat2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Stat2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Stat2 Anticuerpo (B-3): sc-514193
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Stat2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2) | sc-423175-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El transductor de señales y activador de la transcripción 2 (Stat2) es un factor de transcripción central en la señalización de los interferones de tipo I y tipo III en células de ratón, formando el complejo ISGF3 con STAT1 e IRF9 para impulsar la expresión de genes estimulados por interferón. Tras la unión a IFNAR/IFNLR, JAK1 y TYK2 fosforilan STAT2 para coordinar programas de defensa antiviral, presentación de antígenos y una remodelación transcripcional más amplia de la inmunidad innata. La actividad de Stat2 modula la comunicación cruzada con NF-κB y vías inflamatorias asociadas a MAPK, e influye en decisiones del estado celular durante la infección y la activación inmunitaria. La señalización dependiente de STAT2 desregulada se ha vinculado con cambios en la susceptibilidad a desafíos virales y con patología mediada por el sistema inmune, lo que convierte a Stat2 en un nodo genético ampliamente utilizado para estudios mecanísticos de las respuestas al interferón.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Stat2 (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Stat2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Stat2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Stat2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Stat2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Stat2 para la investigación de la señalización de Stat2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Stat2 críticos para la función de Stat2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Stat2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Stat2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Stat2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Stat2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Stat2 (m) y el plásmido HDR Stat2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Stat2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Stat2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.