Stat1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423174-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Stat1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Stat1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Stat1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Stat1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Stat1 Anticorpo (C-136): sc-464
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Stat1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423174-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Stat1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423174-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O transdutor de sinal e ativador de transcrição 1 (Stat1) é um fator de transcrição central na sinalização imunológica inata e adaptativa, induzida por interferons, em células de camundongo. Após a ativação a jusante das quinases JAK, a STAT1 forma homo- ou heterodímeros e transloca-se para o núcleo para regular genes estimulados por interferon envolvidos na defesa antiviral, na apresentação de antígenos, na apoptose e no controle do crescimento. A atividade de Stat1 integra sinais das vias de IFN-α/β e IFN-γ e interage com redes de sinalização inflamatória que moldam a ativação de macrófagos e as respostas de células T. A sinalização desregulada de Stat1 é amplamente estudada em contextos de disfunção imune e inflamação, e também influencia a suscetibilidade à infecção e a vigilância imune antitumoral em modelos experimentais.
Stat1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Stat1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Stat1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Stat1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Stat1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.