Plásmido Doble Nickase (h) StARD10: sc-408191-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)StARD10 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa StARD10 (h) y el plásmido de doble nickasa StARD10 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a STARD10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: StARD10 Anticuerpo (C-11): sc-365580
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) StARD10 | sc-408191-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) StARD10 | sc-408191-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STARD10 codifica StARD10, una proteína de transferencia de lípidos con dominio START que se une a fosfolípidos y contribuye al manejo intracelular de lípidos y a la homeostasis de las membranas. Se la ha implicado en la coordinación de la señalización lipídica con el tráfico vesicular y la función de los orgánulos, procesos que influyen en las vías de secreción de insulina y en una regulación metabólica más amplia. Estudios genéticos y funcionales en humanos han vinculado STARD10 con la susceptibilidad a enfermedades metabólicas, incluidos rasgos relacionados con la diabetes tipo 2, y se ha asociado una composición lipídica alterada con la disfunción de las células β. En consecuencia, STARD10 se estudia con frecuencia en el contexto de redes de señalización mediadas por lípidos, la fisiología de células endocrinas y las respuestas de estrés celular asociadas al metabolismo.
StARD10 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus STARD10 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de STARD10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de STARD10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con STARD10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.