STAMBP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404726

Descripción general

STAMBP codifica una enzima desubiquitinante de la familia JAMM (AMSH) que se une a componentes de ESCRT-0 como STAM y HGS para editar las cadenas de ubiquitina en la carga endocitada. Al regular la clasificación dependiente de ubiquitina, STAMBP ayuda a controlar la desregulación a la baja de receptores, el tráfico endosomal y la degradación lisosomal, modulando así las salidas de señalización de vías que incluyen EGFR y otros receptores de factores de crecimiento. La actividad de STAMBP contribuye a la proteostasis y a las respuestas celulares al estrés mediante la modulación de la topología de las cadenas de ubiquitina y de las decisiones sobre el destino de la carga en los endosomas tempranos. La alteración de STAMBP se ha vinculado con fenotipos del neurodesarrollo y desregulación inmunitaria, lo que la convierte en una diana útil para estudiar defectos de la vía endosoma–lisosoma y la señalización por ubiquitina en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO STAMBP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen STAMBP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del STAMBP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de STAMBP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína STAMBP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en STAMBP para la investigación de la señalización de STAMBP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de STAMBP críticos para la función de STAMBP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de STAMBP para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido STAMBP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido STAMBP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus STAMBP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR STAMBP (h) y el plásmido HDR STAMBP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología STAMBP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana STAMBP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.