Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) SSTR2: sc-401618-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SSTR2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SSTR2 Double Nickase (h) et le plasmide SSTR2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SSTR2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SSTR2 Antibody (A-8): sc-365502
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SSTR2 | sc-401618-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SSTR2 | sc-401618-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SSTR2 code le récepteur de la somatostatine 2 (SSTR2), un récepteur couplé aux protéines G qui se lie à la somatostatine afin de réguler la sécrétion neuroendocrine et la signalisation cellulaire. Après activation, SSTR2 se couple généralement aux protéines Gi/o pour diminuer la production d’AMPc, moduler l’activité des canaux calciques et potassiques, et influencer des voies en aval telles que la signalisation MAPK/ERK et PI3K, façonnant ainsi les programmes de prolifération, de différenciation et de sécrétion. L’internalisation du récepteur et son recyclage contrôlent également la durée du signal et la disponibilité du récepteur à la membrane plasmique. Les altérations de l’expression ou de la signalisation de SSTR2 ont été étudiées dans le contexte de la biologie neuroendocrine et du profilage des récepteurs associés aux tumeurs, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques sur la régulation des GPCR et les réseaux de signalisation endocriniens.
SSTR2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SSTR2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SSTR2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SSTR2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SSTR2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.