Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
SRp30c Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403790
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SRp30c El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SRp30c, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SRp30c Anticuerpo (1G7): sc-293314
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SRp30c Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403790 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SRSF9 codifica el factor de empalme rico en serina/arginina SRp30c, una proteína de unión a ARN que contribuye a la selección de sitios de empalme y a la definición de exones durante el procesamiento del pre-ARNm. Mediante interacciones con potenciadores exónicos del empalme y con otras proteínas SR, SRp30c ayuda a coordinar programas de empalme alternativo que determinan la producción de isoformas de transcritos, acoplando el procesamiento del ARN a la transcripción y al destino posterior del ARNm. Estas decisiones de empalme pueden influir en el control del ciclo celular, las respuestas al estrés y las redes de expresión génica asociadas a la diferenciación. La actividad desregulada de proteínas SR y los patrones de empalme alterados están ampliamente implicados en la biología del cáncer y de enfermedades neurodegenerativas, lo que convierte a SRSF9 en un nodo relevante para estudios mecanísticos de fenotipos impulsados por el empalme.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SRp30c (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SRSF9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SRSF9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SRSF9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SRp30c.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SRSF9 para la investigación de la señalización de SRp30c, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SRSF9 críticos para la función de SRp30c
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SRSF9 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SRp30c CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SRp30c CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SRSF9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SRp30c (h) y el plásmido HDR SRp30c (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SRSF9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SRSF9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.