Plásmido Doble Nickase (m) SR-2B: sc-420994-NIC

El gen murino **Htr2b** codifica el receptor de serotonina **SR-2B (5-HT2B)**, un receptor acoplado a proteína G que se acopla principalmente a **Gq/11** para estimular la señalización de la **fosfolipasa C**, la producción de **fosfatos de inositol**, la movilización de **Ca2+ intracelular** y la actividad aguas abajo de la vía **PKC/MAPK**. SR-2B contribuye a la regulación serotoninérgica del **tono vascular**, el **desarrollo y remodelado cardíacos**, y a procesos del **SNC** que incluyen la señalización sináptica y las respuestas neuroinflamatorias. La actividad alterada de **Htr2b** se ha implicado en vías relevantes para la **disfunción cardiovascular** y el **remodelado fibrótico**, así como en fenotipos neuropsiquiátricos vinculados a un desequilibrio de los circuitos serotoninérgicos. Estas características hacen de **Htr2b** un objetivo útil para desentrañar la señalización de segundos mensajeros impulsada por GPCR, las respuestas transcripcionales y la regulación serotoninérgica específica de tejido en modelos murinos.

SR-2B El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Htr2b en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Htr2b. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Htr2b. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Htr2b alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.