非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SPTLC1 抗体 (H-1): sc-374143. Hep G2 (A) 和 3T3-L1 (B) 全细胞裂解液中 SPTLC1 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SPTLC1双切口酶质粒(m): sc-435265-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SPTLC1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SPTLC1双切酶质粒（m）和SPTLC1双切酶质粒（m2）编码针对Sptlc1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SPTLC1: sc-374143，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SPTLC1双切口酶质粒(m) | sc-435265-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SPTLC1双切口酶质粒(m2) | sc-435265-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sptlc1 编码丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱基亚基 1（SPTLC1），它是丝氨酸棕榈酰转移酶复合体的核心组分，该复合体催化从头（de novo）鞘脂生物合成的第一步且为限速步骤。通过控制鞘氨醇类碱基以及下游神经酰胺和鞘磷脂的生成，SPTLC1 有助于调节膜组成、脂质信号传导和细胞器功能（包括内质网稳态）。SPTLC1 活性改变会扰乱鞘脂通量，进而影响应激反应、线粒体生理以及神经元维持等过程。SPTLC1 功能失调与鞘脂失衡相关的疾病有关，因此常用于脂质代谢与神经生物学的机制研究。
SPTLC1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Sptlc1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sptlc1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Sptlc1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Sptlc1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。