Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SPTLC1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-435265-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SPTLC1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SPTLC1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase SPTLC1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sptlc1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SPTLC1 Anticorpo (H-1): sc-374143
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SPTLC1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-435265-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SPTLC1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-435265-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sptlc1 codifica a subunidade 1 da base de cadeia longa da serina palmitoiltransferase (SPTLC1), um componente central do complexo serina palmitoiltransferase que catalisa a primeira etapa — e limitante da velocidade — da biossíntese de novo de esfingolipídios. Ao controlar a produção de bases esfingoides e, a jusante, de ceramidas e esfingomielinas, a SPTLC1 ajuda a regular a composição de membranas, a sinalização lipídica e a função de organelas, incluindo a homeostase do retículo endoplasmático (RE). Alterações na atividade da SPTLC1 podem perturbar o fluxo de esfingolipídios, afetando processos como respostas ao estresse, fisiologia mitocondrial e manutenção neuronal. A desregulação de SPTLC1 está implicada em distúrbios associados a desequilíbrio de esfingolipídios, o que sustenta seu uso em estudos mecanísticos de metabolismo lipídico e neurobiologia.
SPTLC1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sptlc1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sptlc1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sptlc1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sptlc1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.