Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SP-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422901
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SP-B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SP-B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SP-B Anticorpo (F-2): sc-133143
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SP-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422901 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sftpb codifica a proteína do surfactante B (SP-B), uma proteína secretada hidrofóbica essencial para a montagem e a função do surfactante pulmonar em células epiteliais alveolares do tipo II. A SP-B promove a adsorção de fosfolipídios e a estabilidade do filme na interface ar–líquido, sustentando a complacência alveolar e uma troca gasosa eficiente. Seu processamento e tráfego estão intimamente ligados à biogênese dos corpos lamelares e a vias secretórias reguladas, e a interrupção da SP-B perturba a homeostase do surfactante e as respostas de estresse celular no pulmão distal. Alterações na expressão ou na função de Sftpb são amplamente utilizadas como uma ferramenta molecular para estudar mecanismos de disfunção do surfactante e fenótipos de lesão pulmonar em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SP-B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sftpb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sftpb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sftpb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SP-B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sftpb para a investigação da sinalização de SP-B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sftpb críticos para a função SP-B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sftpb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SP-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SP-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sftpb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SP-B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SP-B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sftpb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sftpb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.