SNAT2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426728

Descripción general

Slc38a2 codifica el transportador murino de aminoácidos neutros acoplado a sodio SNAT2 (SLC38A2), un transportador del sistema A que media la captación de pequeños aminoácidos neutros como la glutamina, la alanina y la serina de manera dependiente de Na⁺. SNAT2 contribuye a la detección celular de nutrientes y a la adaptación metabólica, conectando la disponibilidad de aminoácidos con programas sensibles al estrés, incluido el eje de respuesta integrada al estrés/ATF4 y la regulación posterior de la señalización de mTORC1. Al modular las reservas intracelulares de aminoácidos, SNAT2 influye en el equilibrio redox, la bioenergética y la síntesis proteica en células en proliferación y en diferenciación. La desregulación del transporte de aminoácidos y del manejo de la glutamina se estudia con frecuencia en contextos como la remodelación metabólica, la función de las células inmunitarias y la biología del cáncer, lo que convierte a Slc38a2 en un punto útil para explorar fenotipos dependientes de nutrientes en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SNAT2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Slc38a2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Slc38a2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Slc38a2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SNAT2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Slc38a2 para la investigación de la señalización de SNAT2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Slc38a2 críticos para la función de SNAT2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Slc38a2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SNAT2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SNAT2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Slc38a2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SNAT2 (m) y el plásmido HDR SNAT2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Slc38a2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Slc38a2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.