Plasmide Double Nickase (h) SMG8: sc-408902-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SMG8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SMG8 Double Nickase (h) et le plasmide SMG8 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SMG8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SMG8 | sc-408902-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SMG8 | sc-408902-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMG8 code une sous-unité régulatrice centrale du complexe kinase SMG1 (SMG1–SMG8–SMG9), qui contrôle la phosphorylation d’UPF1 et la progression de la dégradation des ARNm médiée par non-sens (NMD). En modulant l’efficacité de la NMD et son couplage à la surveillance de la terminaison de la traduction, SMG8 contribue à maintenir la qualité du transcriptome et influence l’homéostasie de l’ARN, les réponses au stress et la protéostasie. La perturbation des régulateurs de la NMD, y compris des composants du complexe associé à SMG8, peut modifier la stabilité d’ARNm aberrants ou régulateurs, avec des effets en aval sur des voies gouvernant la croissance et la différenciation cellulaires. Par conséquent, SMG8 est fréquemment étudié dans le contexte du contrôle de l’expression génique, du remodelage des voies de dégradation de l’ARN et de la dérégulation du transcriptome pertinente pour les maladies.
SMG8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SMG8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SMG8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SMG8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SMG8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.