Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) Smad2: sc-421525-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Smad2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Smad2 (m) y el plásmido de doble nickasa Smad2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Smad2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Smad2 Anticuerpo (YZ-13): sc-101153
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Smad2 | sc-421525-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Smad2 | sc-421525-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El Smad2 de ratón codifica un factor de transcripción R‑SMAD que transmite señales desde los receptores de TGF‑β/Activina hasta el núcleo, donde coopera con SMAD4 para regular programas de expresión génica dependientes del contexto. Mediante la formación de complejos dependiente de la fosforilación y la interacción con la cromatina, SMAD2 controla procesos como la transición epitelio‑mesénquima, la remodelación de la matriz extracelular, la regulación del ciclo celular y la especificación de linajes durante el desarrollo. La actividad de Smad2 se entrecruza con las vías de señalización MAPK y PI3K y está modulada por SMADs inhibidoras y por el recambio mediado por ubiquitina, lo que determina la duración y la amplitud de la señal. La señalización desregulada de TGF‑β/SMAD2 se estudia con frecuencia en fibrosis, inflamación y biología del cáncer, donde el equilibrio de la vía influye en la proliferación, la diferenciación y los fenotipos invasivos.
Smad2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Smad2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Smad2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Smad2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Smad2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.