Plásmido Doble Nickase (h) Sigma Receptor: sc-400615-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Sigma Receptor consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sigma Receptor (h) y el plásmido de doble nickasa Sigma Receptor (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SIGMAR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sigma Receptor Anticuerpo (B-5): sc-137075
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Sigma Receptor | sc-400615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Sigma Receptor | sc-400615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SIGMAR1 humano codifica el receptor sigma-1, una chaperona de membrana del retículo endoplásmico enriquecida en las membranas asociadas a mitocondrias que regula el intercambio de calcio, la homeostasis lipídica y la señalización sensible al estrés. Al modular la actividad del receptor de IP3, el anclaje entre el RE y la mitocondria, y los programas de la respuesta a proteínas mal plegadas, SIGMAR1 influye en la proteostasis, la bioenergética y la supervivencia celular bajo estrés oxidativo y proteotóxico. La señalización del receptor sigma-1 se cruza con la neurotransmisión, la función de los canales iónicos y las vías inflamatorias, vinculando a SIGMAR1 con mecanismos implicados en la neurodegeneración, el dolor neuropático y fenotipos neuropsiquiátricos. Estas propiedades hacen de SIGMAR1 una diana útil para analizar la comunicación entre orgánulos y las redes de adaptación al estrés en modelos celulares humanos.
Sigma Receptor El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SIGMAR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SIGMAR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SIGMAR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SIGMAR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.