Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SH2D1A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422910
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- SH2D1A Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im SH2D1A-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: SH2D1A: sc-398118
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SH2D1A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-422910 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Sh2d1a kodiert SH2D1A (SAP), ein SH2-Domänen-Adaptorprotein, das vorwiegend in T‑Zellen und NK‑Zellen exprimiert wird und Rezeptoren der SLAM-Familie mit nachgeschalteter Signalübertragung koppelt. Durch die Koordination rezeptornaher Komplexe sowie die Modulation von Kinasen und Phosphatasen prägt SH2D1A die Bildung der immunologischen Synapse, zytotoxische Effektorfunktionen und die T‑Zell-Hilfe während antiviraler und humoraler Immunantworten. Eine Störung der SH2D1A-abhängigen Signalgebung beeinträchtigt die Lymphozytenaktivierung und die Immunhomöostase, wodurch SH2D1A für Studien zu Immundysregulation, Anfälligkeit für Virusinfektionen und lymphoproliferativen Phänotypen relevant ist. Mausmodelle für Sh2d1a werden широко eingesetzt, um die Beiträge der SLAM–SAP-Achse zur Keimzentrumsbiologie sowie zur NK-/T‑zellvermittelten Kontrolle infizierter oder transformierter Zellen zu untersuchen.
Das SH2D1A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Sh2d1a-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Sh2d1a-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Sh2d1a nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SH2D1A-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Sh2d1a-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SH2D1A-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Sh2d1a-Exone abzielen, die für die SH2D1A-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Sh2d1a-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom SH2D1A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom SH2D1A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Sh2d1a-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SH2D1A HDR-Plasmid (m) und SH2D1A HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Sh2d1a-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Sh2d1a-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.