Plásmido Doble Nickase (m) SH-PTP2: sc-422503-NIC

El gen murino **Ptpn11** codifica **SH-PTP2 (SHP2)**, una fosfatasa tirosina proteica citoplasmática con dominios SH2 en tándem que retransmite señales procedentes de receptores tirosina cinasa, receptores de citocinas y receptores inmunitarios inhibidores. Al desfosforilar proteínas de acoplamiento clave y modular complejos adaptadores, SH-PTP2 favorece la señalización **RAS–MAPK/ERK** y puede influir en la dinámica de las vías **PI3K–AKT** y **JAK–STAT**, determinando respuestas de proliferación, diferenciación y migración. La actividad de Ptpn11 contribuye a programas de señalización del desarrollo y de la hematopoyesis, y la desregulación de las redes dependientes de SH-PTP2 se estudia ampliamente en modelos de señalización aberrante por factores de crecimiento y de función de células inmunitarias. Como regulador nodal de la señalización por fosfotirosina, Ptpn11 se utiliza con frecuencia para investigar el crosstalk entre vías, el control por retroalimentación y la transducción de señales específica del contexto en células y tejidos de ratón.

SH-PTP2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ptpn11 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ptpn11. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ptpn11. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ptpn11 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.