serum reponse factor /SRF Lentiviral Activation Particles (h): sc-400470-LAC

Humanes SRF (Serum Response Factor) ist ein MADS-Box-Transkriptionsfaktor, der an CArG-Box-Motive bindet, um die Expression von Immediate-Early-Genen sowie zytoskelettale Genprogramme zu steuern. Es integriert Signale aus dem MAPK/ERK-Weg über Ternärkomplexfaktoren und aus der RhoA–Aktin-Dynamik über Myokardin-assoziierte Transkriptionsfaktoren und koordiniert dadurch Proliferation, Differenzierung, Motilität und Stressantworten. Die durch SRF regulierte Transkription ist zentral für Gen-Netzwerke der glatten und der Herzmuskulatur sowie für Aktin-Remodelling‑Signalwege, die Zelladhäsion und Migration prägen. Eine Fehlregulation der SRF-Aktivität und der vorgeschalteten Signalwege wurde mit abnormem Wachstum und invasiven Phänotypen in der Krebsbiologie sowie mit pathologischem Remodelling in kardiovaskulären und fibroseassoziierten Krankheitskontexten in Verbindung gebracht.

serum reponse factor /SRF Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SRF-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

serum reponse factor /SRF Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SRF-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen serum reponse factor /SRF-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SRF-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.