SerpinB1a Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425896-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SerpinB1aO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SerpinB1a (m) e o Plasmídeo Double Nickase SerpinB1a (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Serpinb1a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SerpinB1a Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425896-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SerpinB1a Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-425896-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Serpinb1a codifica o inibidor de proteases de serina SerpinB1a, uma serpin intracelular do clado B que restringe proteases derivadas de neutrófilos, como a elastase, a catepsina G e a proteinase 3, para limitar o dano proteolítico durante a inflamação. Ao modular a remodelação da matriz extracelular impulsionada por proteases e ao regular a sobrevivência de leucócitos, a SerpinB1a influencia a sinalização imunitária inata, as respostas ao stress e a homeostase dos tecidos. Alterações na atividade da SerpinB1a têm sido associadas a fenótipos inflamatórios desregulados, suscetibilidade a lesão tecidular associada a infeções e resolução deficiente das respostas imunitárias. Em modelos de ratinho, a Serpinb1a é, por isso, estudada em vias que ligam a função dos granulócitos, a proteostase inflamatória e o dano em órgãos após inflamação aguda ou crónica.
SerpinB1a O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Serpinb1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Serpinb1a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Serpinb1a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Serpinb1a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.