SerpinA6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407031

Übersicht

SERPINA6 kodiert SerpinA6, auch bekannt als corticosteroid-binding globulin (Corticosteroid-bindendes Globulin). Dabei handelt es sich um ein sezerniertes Mitglied der Serinprotease-Inhibitor-Familie, das vor allem die systemische Bioverfügbarkeit von Glukokortikoiden reguliert, indem es Cortisol im Plasma bindet und transportiert. Durch die Pufferung der freien Cortisolspiegel beeinflusst SerpinA6 die Signalübertragung über den Glukokortikoidrezeptor sowie nachgeschaltete Transkriptionsprogramme, die Stoffwechsel, Immunantworten und Stressphysiologie prägen. Eine veränderte SERPINA6-Expression oder genetische Variation wurde mit einer Fehlregulation der Aktivität der Hypothalamus-Hypophysen-Nebennierenrinden-Achse und cortisolbezogenen Phänotypen in Verbindung gebracht, einschließlich einer erhöhten Anfälligkeit für metabolische und entzündliche Merkmale. In experimentellen Systemen bietet SERPINA6 einen Ansatzpunkt, um das Zusammenspiel endokriner Signalwege mit hepatischen Sekretionswegen und der Homöostase extrazellulärer Proteine zu untersuchen.

Das SerpinA6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SERPINA6-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SERPINA6-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SERPINA6 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SerpinA6-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SERPINA6-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SerpinA6-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SERPINA6-Exone abzielen, die für die SerpinA6-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SERPINA6-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SerpinA6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SerpinA6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SERPINA6-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SerpinA6 HDR-Plasmid (h) und SerpinA6 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SERPINA6-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SERPINA6-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.