Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (h) Septin 5: sc-402514-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Septin 5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Septin 5 Double Nickase (h) et le plasmide Septin 5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SEPT5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Septin 5 Antibody (SP18): sc-20040
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Septin 5 | sc-402514-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **SEPT5** code la septine 5, une protéine cytosquelettique liant le GTP qui s’assemble en filaments de septines hétéro-oligomériques et contribue à l’organisation membranaire, au trafic vésiculaire et au contrôle spatial de la dynamique de l’actine et des microtubules. La septine 5 est enrichie dans les contextes neuronaux et sécrétoires et a été associée à l’exocytose et à l’amarrage des vésicules synaptiques via des interactions avec la machinerie liée aux complexes SNARE. Les échafaudages de septines dépendants de SEPT5 influencent la polarité cellulaire, la cytokinèse et la compartimentation au niveau de la membrane plasmique, des processus qui modèlent le transport intracellulaire et la propagation des signaux. Une expression altérée de SEPT5 ou une perturbation du locus a été rapportée dans des travaux portant sur le neurodéveloppement et la neuropsychiatrie, ainsi que dans des jeux de données d’expression associés au cancer, ce qui étaye son utilisation comme nœud mécanistique dans les études du remodelage du cytosquelette et de la sécrétion.
Septin 5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SEPT5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SEPT5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SEPT5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SEPT5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.