SENP7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405886

Descripción general

SENP7 (proteasa 7 específica de sentrina) es una isopeptidasa específica de SUMO que elimina las modificaciones SUMO2/3 de proteínas diana, regulando así la dinámica de la SUMOilación y la función proteica. Se ha relacionado con procesos asociados a la cromatina, incluido el mantenimiento de la heterocromatina y la respuesta al daño del ADN, donde la señalización dependiente de SUMO ayuda a coordinar el reclutamiento de factores de reparación y la estabilidad del genoma. A través de estas actividades, SENP7 influye en la progresión del ciclo celular y en programas transcripcionales sensibles al estado de la cromatina. La actividad desregulada de proteasas de SUMO, incluida la alteración de la función de SENP7, es relevante en estudios de estrés oncogénico, daño asociado a la replicación y otros contextos en los que una regulación anómala de la cromatina contribuye a fenotipos de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SENP7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SENP7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SENP7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SENP7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SENP7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SENP7 para la investigación de la señalización de SENP7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SENP7 críticos para la función de SENP7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SENP7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SENP7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SENP7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SENP7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SENP7 (h) y el plásmido HDR SENP7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SENP7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SENP7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.