SENP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429217

Descripción general

Senp2 codifica la proteasa 2 específica de sentrina/SUMO (SENP2), una enzima desSUMOilante que revierte la conjugación de SUMO para regular la estabilidad de las proteínas, su localización subcelular y los programas transcripcionales. La actividad de SENP2 modula el control dependiente de SUMO de la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño en el ADN y el transporte nuclear, e influye en nodos de señalización como NF-κB y las vías de estrés asociadas a p53. En sistemas murinos, Senp2 se ha relacionado con fenotipos del desarrollo y cardiovasculares, y se estudia con frecuencia por su impacto en la inflamación, la regulación metabólica y la homeostasis celular. La disfunción de las proteasas SUMO puede alterar la proteostasis y procesos asociados a la cromatina que son relevantes para el modelado de enfermedades y el análisis de vías.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SENP2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Senp2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Senp2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Senp2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SENP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Senp2 para la investigación de la señalización de SENP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Senp2 críticos para la función de SENP2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Senp2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SENP2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SENP2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Senp2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SENP2 (m) y el plásmido HDR SENP2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Senp2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Senp2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.