SEMA4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422881
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SEMA4B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SEMA4B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SEMA4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422881 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sema4b codifica a pista de orientação transmembranar SEMA4B, uma semaforina de classe 4 que participa de sinalização dependente de contato para regular a adesão celular, a migração e a remodelação do citoesqueleto. Em tecidos de camundongo, a SEMA4B contribui para a orientação axonal e a organização sináptica e tem sido implicada em respostas gliais e neuronais a sinais inflamatórios e associados a lesão. A sinalização por semaforinas cruza com vias que controlam as GTPases da família Rho e cascatas de quinases associadas a receptores, moldando a motilidade direcional e o padrão de organização tecidual. Redes de semaforinas desreguladas, incluindo a sinalização associada à SEMA4B, são estudadas em contextos de perturbações do neurodesenvolvimento, neuroinflamação e interações entre tumor e microambiente, nas quais sinais de orientação influenciam a invasão e o posicionamento de células imunes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SEMA4B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sema4b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sema4b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sema4b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SEMA4B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sema4b para a investigação da sinalização de SEMA4B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sema4b críticos para a função SEMA4B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sema4b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SEMA4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SEMA4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sema4b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SEMA4B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SEMA4B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sema4b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sema4b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.