Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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SEMA3E Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422878
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SEMA3E O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SEMA3E, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SEMA3E Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422878 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Sema3e de camundongo codifica a semaforina-3E (SEMA3E), um sinal de orientação secretado que atua principalmente por meio de receptores plexina para controlar o direcionamento de axônios, a migração neuronal e o padrão de organização dos tecidos. A SEMA3E modula a dinâmica do citoesqueleto e a adesão celular, interagindo, de modo dependente do contexto, com vias que regulam a motilidade, o remodelamento angiogênico e o tráfego de células imunes. A desregulação da sinalização SEMA3E–plexina tem sido associada na literatura a desenvolvimento vascular aberrante e a alterações do comportamento invasivo em modelos de biologia do câncer, reforçando sua relevância para estudos de neurodesenvolvimento e sinalização do microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SEMA3E (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sema3e em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sema3e, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sema3e na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SEMA3E.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sema3e para a investigação da sinalização de SEMA3E, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sema3e críticos para a função SEMA3E
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sema3e para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SEMA3E Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SEMA3E Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sema3e. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SEMA3E Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SEMA3E (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sema3e para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sema3e definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.