Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Sam 68 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422795
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Sam 68 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Sam 68, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sam 68 Anticuerpo (H-4): sc-514468
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Sam 68 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422795 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Khdrbs1 codifica la proteína de unión a ARN Sam 68 (KHDRBS1), un regulador de la familia STAR de la expresión génica postranscripcional que conecta la transducción de señales con el metabolismo del ARN. Sam 68 se une a elementos específicos de ARN para controlar el empalme alternativo, la exportación de ARNm, su estabilidad y su traducción, y participa en complejos ribonucleoproteicos dinámicos, incluidas vías asociadas a los gránulos de estrés. Mediante interacciones dependientes de fosforilación con quinasas de la familia Src y otros nodos de señalización, Sam 68 influye en la progresión del ciclo celular, la apoptosis y programas de diferenciación. La desregulación del empalme y del procesamiento de ARN mediados por KHDRBS1/Sam 68 se ha vinculado con señalización oncogénica, fenotipos del neurodesarrollo y estados transcripcionales relacionados con el sistema inmunitario, lo que respalda su amplia utilidad en estudios mecanísticos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Sam 68 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Khdrbs1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Khdrbs1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Khdrbs1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Sam 68.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Khdrbs1 para la investigación de la señalización de Sam 68, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Khdrbs1 críticos para la función de Sam 68
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Khdrbs1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Sam 68 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Sam 68 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Khdrbs1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Sam 68 (m) y el plásmido HDR Sam 68 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Khdrbs1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Khdrbs1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.