Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Sam 68 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422795
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sam 68 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Sam 68, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sam 68 Anticorpo (H-4): sc-514468
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sam 68 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422795 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Khdrbs1 codifica a proteína de ligação a RNA Sam 68 (KHDRBS1), um regulador da família STAR da expressão gênica pós-transcricional que conecta a transdução de sinais ao metabolismo de RNA. Sam 68 liga-se a elementos específicos de RNA para controlar o splicing alternativo, a exportação de mRNA, a estabilidade e a tradução, e participa de complexos ribonucleoproteicos dinâmicos, incluindo vias associadas a grânulos de estresse. Por meio de interações dependentes de fosforilação com quinases da família Src e outros nós de sinalização, Sam 68 influencia a progressão do ciclo celular, a apoptose e programas de diferenciação. A desregulação do splicing e do processamento de RNA mediados por KHDRBS1/Sam 68 tem sido associada à sinalização oncogênica, a fenótipos do neurodesenvolvimento e a estados transcricionais relacionados ao sistema imune, sustentando sua ampla utilidade em estudos mecanísticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sam 68 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Khdrbs1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Khdrbs1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Khdrbs1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sam 68.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Khdrbs1 para a investigação da sinalização de Sam 68, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Khdrbs1 críticos para a função Sam 68
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Khdrbs1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Sam 68 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Sam 68 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Khdrbs1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Sam 68 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Sam 68 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Khdrbs1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Khdrbs1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.