Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
S-100A16 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426783
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- S-100A16 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico S-100A16, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: S-100A16 Anticuerpo (G-7): sc-390151
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
S-100A16 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426783 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino S100a16 codifica S-100A16, una pequeña proteína de unión a calcio tipo EF-hand de la familia S100 que modula la señalización dependiente de calcio y las interacciones proteína–proteína. S-100A16 se ha vinculado con la regulación de la organización del citoesqueleto, la motilidad celular y las respuestas al estrés celular, con funciones descritas en programas de diferenciación y en la remodelación de la red de actina. Mediante interacciones con nodos de señalización que influyen en procesos asociados a MAPK y a las GTPasas Rho, S-100A16 puede afectar la dinámica de adhesión y las salidas transcripcionales. La expresión desregulada de S100A16 se ha asociado con remodelación tisular patológica y fenotipos oncogénicos en múltiples contextos, lo que la convierte en un blanco útil para estudios mecanísticos de proliferación, migración y vías asociadas a la inflamación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO S-100A16 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen S100a16 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del S100a16 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de S100a16 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína S-100A16.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en S100a16 para la investigación de la señalización de S-100A16, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de S100a16 críticos para la función de S-100A16
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de S100a16 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido S-100A16 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido S-100A16 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus S100a16. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR S-100A16 (m) y el plásmido HDR S-100A16 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología S100a16 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana S100a16 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.