Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (h) RSAD2: sc-402884-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RSAD2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RSAD2 Double Nickase (h) et le plasmide RSAD2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RSAD2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RSAD2 Antibody (G-8): sc-390342
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RSAD2 | sc-402884-NIC | 20 µg | $410.00 |
RSAD2 (également appelé viperin) code une enzyme radicalaire S‑adénosyl‑L‑méthionine (SAM) induite par les interférons, qui se localise principalement au réticulum endoplasmique et aux membranes associées aux gouttelettes lipidiques afin de coordonner les réponses antivirales innées. RSAD2 est induit en aval de la signalisation des récepteurs de reconnaissance des motifs (PRR) et des voies des interférons de type I/III, et peut moduler le métabolisme lipidique cellulaire ainsi que l’organisation membranaire, ce qui influence la réplication des pathogènes. Par ses interactions avec des composants de la signalisation de l’immunité innée et ses effets sur les réseaux métaboliques, RSAD2 contribue à la régulation des programmes de gènes stimulés par les interférons et à la dynamique des signaux inflammatoires. Une expression dérégulée de RSAD2 a été rapportée dans divers contextes d’infections virales et de pathologies associées à l’immunité, ce qui en fait un nœud utile pour étudier les interactions hôte–pathogène et les états transcriptionnels induits par les interférons.
RSAD2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RSAD2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RSAD2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RSAD2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RSAD2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.