Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RRS1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409839
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RRS1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RRS1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RRS1 Anticuerpo (H-5): sc-515462
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RRS1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409839 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RRS1 (homólogo del regulador de biogénesis ribosomal) es una proteína nucleolar conservada esencial para la maduración y la exportación de la subunidad ribosomal 60S, gracias a sus funciones en el procesamiento del pre-rRNA y en el ensamblaje de precursores de la subunidad grande. Interactúa con factores de biogénesis ribosomal y contribuye a la organización nucleolar, vinculando la capacidad de traducción con el crecimiento celular y la progresión del ciclo celular. La alteración de la producción de ribosomas puede activar la señalización de estrés nucleolar y modificar los puntos de control dependientes de p53, lo que convierte a RRS1 en un nodo útil para estudiar la proteostasis y el control del crecimiento. La regulación aberrante de las vías de biogénesis ribosomal, incluidos componentes como RRS1, se asocia con frecuencia a fenotipos proliferativos y es relevante para estudios mecanísticos en biología del cáncer y ribosomopatías relacionadas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RRS1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RRS1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RRS1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RRS1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RRS1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RRS1 para la investigación de la señalización de RRS1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RRS1 críticos para la función de RRS1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RRS1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RRS1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RRS1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RRS1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RRS1 (h) y el plásmido HDR RRS1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RRS1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RRS1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.