Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RGS8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403199
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RGS8 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RGS8, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RGS8 Anticuerpo (F-3): sc-398949
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RGS8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403199 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RGS8 (regulador de la señalización de proteínas G 8) es una proteína activadora de la GTPasa que acelera la terminación de la señalización iniciada por los GPCR al promover la inactivación de la subunidad Gα. En células humanas, RGS8 modula las salidas de segundos mensajeros, como las vías de cAMP/PKA y PLCβ/Ca2+, dando forma a la amplitud y la duración de las respuestas impulsadas por receptores. Está enriquecida en contextos neuronales y contribuye al control de la señalización sináptica y de la excitabilidad de las redes mediante la regulación de cascadas acopladas a Gi/o y Gq. La expresión o actividad alteradas de RGS8 se han investigado en relación con una neurotransmisión desregulada y fenotipos neuropsiquiátricos, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos del ajuste fino de las vías de GPCR.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RGS8 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RGS8 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RGS8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RGS8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RGS8.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RGS8 para la investigación de la señalización de RGS8, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RGS8 críticos para la función de RGS8
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RGS8 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RGS8 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RGS8 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RGS8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RGS8 (h) y el plásmido HDR RGS8 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RGS8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RGS8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.