Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rent3b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406904
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rent3b O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Rent3b, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rent3b Anticorpo (D-1): sc-514564
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rent3b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406904 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
UPF3B codifica Rent3b, um componente central da maquinaria de degradação de mRNA mediada por nonsense (NMD), que protege a integridade do transcriptoma ao eliminar mRNAs contendo códons de terminação prematuros e ao regular subconjuntos de transcritos fisiológicos. Rent3b associa-se à vigilância ligada ao complexo de junção de éxons (exon junction complex) e interage com fatores de NMD como UPF2 e UPF1 para acoplar a terminação da tradução à degradação direcionada de RNA. Por meio dessas atividades, UPF3B influencia o controle de qualidade de RNA, a homeostase da expressão gênica e respostas celulares ao estresse associadas ao processamento aberrante de mRNA. A disrupção do NMD dependente de UPF3B tem sido associada a fenótipos de neurodesenvolvimento e a programas de expressão alterados relevantes para distúrbios neurológicos e outras doenças associadas ao metabolismo de RNA.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rent3b (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene UPF3B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do UPF3B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do UPF3B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rent3b.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de UPF3B para a investigação da sinalização de Rent3b, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) UPF3B críticos para a função Rent3b
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos UPF3B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Rent3b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Rent3b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus UPF3B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Rent3b Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Rent3b (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia UPF3B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo UPF3B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.